簡析RNA幹擾（rǎo）技術類97免费人妻在线观看

RNA幹擾技術（RNA interference，以（yǐ）下簡稱RNAi）是一種高度保守（shǒu）的基（jī）因沉默機製，由小分子RNA介導，通過（guò）基因序列特異性方（fāng）式降解信使（shǐ）RNA（mRNA）或抑製其翻譯。自1998年美國科學家Fire和Mello在線蟲中發現RNAi現象並因此獲得2006年諾貝爾生理學或醫學獎以來（lái），該技術已成為基因功能研究、藥物開發和農業生物技術的重（chóng）要工具，特別是隨著轉（zhuǎn）基因（yīn）玉（yù）米品種DvSnf7 dsRNA（商品名為SmartStax PRO）的成功（gōng）商品化（huà），RNAi97免费人妻在线观看（yào）的研發成（chéng）為農業病蟲害防治的熱點（diǎn）。本文簡要介紹了RNAi97免费人妻在线观看的作用機製、關鍵技術（shù）控製點，以及與化學97免费人妻在线观看（yào）的區（qū）別，希望能為國（guó）內相關（guān）工作（zuò）提供參考。

1 定義與作用機製

RNAi是生物體內天然的基因沉默機（jī）製，廣泛存在於植物、動物、真菌等真（zhēn）核生物中，其核心功能是調控基因表達和防禦外源核酸（如（rú）病（bìng）毒）的入侵。RNAi97免费人妻在线观看就是利用該沉默（mò）機製設計的一種核酸藥物（wù），通過遞送外源基因分子進入害蟲或病原體細胞（bāo）內，沉默或幹擾目標生物的靶標（biāo）基因（需要被沉默的內源基因），阻斷（duàn）特定蛋白的合成，從而抑製其生長或繁殖。

2 構成與類別

RNAi97免费人妻在线观看發揮（huī）功效需（xū）要將（jiāng）外源基因分子送入目標（biāo）生物體內，因此（cǐ）它的物理構成可以簡單地概念化為“外（wài）源基因分子+遞送載體”。

2.1 外源基因分子 它是RNAi97免费人妻在线观看的活性成分，是人工設計的核酸分子，用（yòng）於（yú）沉默靶標基因。能夠觸（chù）發RNA幹擾的RNA分子有多種類型，雙鏈RNA（dsRNA）、小幹擾RNA（siRNA ）、短發夾（shRNA）為主要類（lèi）型，其中dsRNA目前已在（zài）97免费人妻在线观看領域有成功的應（yīng）用案例。如美國已商（shāng）品化的轉基因玉米品種DvSnf7 dsRNA（商品名為SmartStax PRO）的分子類型也是dsRNA，其通（tōng）用名（míng）中的“Dv”是（shì）目標害蟲（Diabrotica virgifera）的學名縮寫，“Snf7”是目標害蟲被沉默的靶標基因（Vacuolar protein sorting-associated protein 7）的標準名稱，“dsRNA”是外源基因（yīn）分子類型。同時OECD也已發布（bù）針對dsRNA分（fèn）子類型97免费人妻在线观看的環境和膳（shàn）食風險評估指導文件，（表1）。

表1 RNAi 3種分子類型的（de）區別

2.2 遞送載體 它是用於保護、運輸並增強外源基因分子進入目標生物細胞內的傳（chuán）遞係統。遞送載體的材料主要有化學載體和生物載體兩類。化學載體的材質主要有脂質體、聚合物或無機納米顆粒等。生物載（zǎi）體主要有工程微生物載體、病毒樣顆粒和轉基因生物載體（tǐ）等。轉基因玉米品種DvSnf7 dsRNA使用的就是轉基因生物載（zǎi）體。

3 關（guān）鍵技術控製點

RNAi97免费人妻在线观看（yào）的研發涉及多個技術環節，但主要是（shì）通過靶標（biāo）基因（yīn）分析、外源基因設計和遞送係統優化等3個相互關聯的技術閉環，實（shí）現其能夠精準沉默目標害蟲的特定基因，同時不影響非目標生物（如益蟲、作物或哺乳動物）的特異（yì）性目標。

3.1 靶標基因（yīn）的分析 作為靶標基因需要同時具備必需性、開放性和（hé）高異源性。必需性是指被選基因必須是（shì）目標生物存活必（bì）需的（de）基因（yīn），受幹擾就會致死。開放性是（shì）必須靶向mRNA開放區域，避免折疊區，以提升（shēng）RNA誘導沉默複合體（RISC複合體）結合率。異源性（xìng）是指不同物種（zhǒng）間基因序列的差異（yì）程度。作為（wéi）靶（bǎ）標基因必須是目（mù）標生物特有或高保守的基因靶點，且在同種群中基因序列（liè）高度同源，與非靶標生物的同源基因差（chà）異顯著。已商品化的轉基因玉米品（pǐn）種DvSnf7 dsRNA中靶標基因Snf7，與（yǔ）同種群鞘翅目昆蟲98%同源，但與（yǔ）哺乳動物基因連續（xù）匹配僅9 nt。

3.2 外源基因設計 外（wài）源基因是（shì）誘導靶標基因沉默（mò）的工具，決定這個工具效率的核心要素是互（hù）補（bǔ）性與異源性。互補性指外源基因與（yǔ）靶標mRNA在堿基序列上的配對匹配程（chéng）度。匹配度是（shì）確保基因沉默效率和（hé）特異性的核心指標，不同分子類（lèi）型的匹配要求稍（shāo）有差異，但在種（zhǒng）子區和（hé）切割位點等核心區通常要求絕對匹配。非核心區允（yǔn）許有限錯（cuò）配，短鏈的siRNA的可（kě）容忍1～2個錯（cuò）配，長（zhǎng）鏈的dsRNA允許≤5%錯配。外源基（jī）因的異源性是要保證人工設計的外（wài）源基因與非靶標生物（wù）基因（yīn）的（de）序列有顯著差異，以確保僅（jǐn）靶向目標生（shēng）物特定基（jī）因，不會影響（xiǎng）其他基因（yīn），且不會沉默非目標物種（如哺乳動（dòng）物、傳粉昆蟲等）。目前（qián），EPA要求與非靶基因連（lián）續（xù）匹配≤11 nt，EFSA要求全基（jī）因組相似（sì）性（xìng）＜50%。已商品化的DvSnf7 dsRNA，它的外源基因分子與蜜蜂基因最長連（lián）續匹配（pèi）僅（jǐn）9 nt。

3.3 遞送係統的優化 遞送係統功能是確保能將外源基因分子（zǐ）精準送（sòng）達害（hài）蟲或病原體細胞（bāo）內，核心要素是環境穩定性、屏（píng）障突破和可控釋放。環境穩定性目前是通過核酸（suān）修飾和紫外防護（hù）等措施（shī），延長外源基因分子在植物體內和土壤中半衰期，以（yǐ）及提高在高溫環境下的活性。屏障突（tū）破是通過納米尺（chǐ）寸控製、添加表麵活（huó）性劑（jì）等措施，保證外源基因分子能突破害蟲或病原體體壁或腸（cháng）壁等多（duō）重生物屏障。可控釋（shì）放是通過時間、空間和劑量等3個維度，控製外源基因在目標生物體內的精準釋放，以確保外源基因分（fèn）子濃度僅夠沉默靶基因，不會影響低親和（hé）力（lì）的（de）非靶標基因。

4 與化（huà）學97免费人妻在线观看（yào）風險管（guǎn）控的差異

RNAi97免费人妻在线观看因其特異性，決定了它與化學97免费人妻在线观看在（zài）防治範圍和風險評估（gū）側重點上有較大區別。

4.1 防治範圍 較之化（huà）學農（nóng）藥對農（nóng）業病蟲害較寬泛的（de）“化學幹（gàn）預”特點，RNAi97免费人妻在线观看具有精準（zhǔn）的（de）“信息幹預”特（tè）點，因此（cǐ）它在防治（zhì）範圍上不具備化學97免费人妻在线观看那樣跨目（mù）級的廣譜（pǔ）防治功能。其原因（yīn），一是受基因靶點保（bǎo）守性的限製，如不同目級的昆（kūn）蟲（如鞘翅目與（yǔ）鱗翅目）同源基（jī）因序列（liè）差（chà）異都比較大，單一外源（yuán）基因分子難以同（tóng）時有效，即使同目級，不同科/屬的昆蟲同源基因（yīn）也存在顯（xiǎn）著差異。實現有限範圍的多靶（bǎ）點，是當下研究的熱點（diǎn）。二是受遞送係統的限製。不同害蟲或病原體的體壁結構或細胞壁結（jié）構都存在差異（yì），目前（qián）同一載體在跨種群高效遞送方麵存在（zài）技術瓶頸。

4.2 風險評估（gū） RNAi97免费人妻在线观看風險（xiǎn）評估技術原理與（yǔ）化（huà）學農（nóng）藥基本一致，也需（xū）從危害識別、暴（bào）露評估等環節評估其對生態環境、人體健康的風險，它與（yǔ）化學（xué）97免费人妻在线观看最大的（de）區（qū）別（bié）在於需（xū）要同時（shí）評價外源基因分子和遞送係統，重點是遞送係（xì）統的毒（dú）性和脫靶效（xiào）應。

4.2.1 活性成分（外源基因（yīn）分（fèn）子） 主要（yào）評價靶標基因特異性（xìng）、環境歸趨和健康風險，確（què）保對非靶標基因（哺乳動物、傳粉昆蟲等）無交叉活性，降（jiàng）解物的生態風險和通過（guò）食物鏈傳遞的風險可接受。

4.2.2 遞送載體 雖然遞送載體在RNAi97免费人妻在线观看（yào）中有點類似化學97免费人妻在线观看的助劑，但在功能上與化學助劑存在（zài）本質區別，（表2）。

表2 遞送載體與常規97免费人妻在线观看（yào）助劑的區別

在（zài）OECD和EPA的相關規定中（zhōng）對載（zǎi）體材料本身的毒性評估是風（fēng）險評估的重點。評估（gū）的主要內容包（bāo）括：載體材（cái）料本身的毒性（xìng）、環境行為與歸（guī）趨、生態毒性、載體-外源（yuán）基因分（fèn）子（zǐ）複合物特（tè）性等。如是生物載體，需要評估生物載體的潛在毒性，包括評估載體是否引發宿主（zhǔ）的免疫反應等。

5 結束語

RNAi97免费人妻在线观看通過（guò）精準調控基因表（biǎo）達，在（zài）農業綠色防控上展現出較大的潛力，但（dàn）在遞送效（xiào）率和脫靶效應等（děng）方麵仍麵臨挑戰。隨（suí）著相關技術的進步，或將（jiāng）成為化（huà）學97免费人妻在线观看（yào）的重要補充手段。